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Article: HBx蛋白及其羧基末端缺失35个氨基酸的突变体对正常肝细胞增殖的影响
Title | HBx蛋白及其羧基末端缺失35个氨基酸的突变体对正常肝细胞增殖的影响 Impact of wild-type and carboxyl-terminal truncated hepatitis B virus X on hepatocyte proliferation |
---|---|
Authors | |
Keywords | 慢病毒载体 tHBxΔ35 HBx基因 细胞增殖 肝细胞 |
Issue Date | 2018 |
Publisher | Baishideng Publishing Group. The Journal's web site is located at http://xxhb.chinajournal.net.cn/ |
Citation | 世界华人消化杂志, 2018, v. 26 n. 13, p. 760-768 How to Cite? |
Abstract | 目的
构建野生型HBx(wild-type HBx, wt-HBx)和自然突变体HBx(truncated HBx, tHBxΔ35)重组慢病毒表达载体, 建立稳定转染细胞株, 观察wt-HBx和tHBxΔ35对肝细胞增殖和凋亡的影响.
方法
构建TOPO3.1- wt-HBx和TOPO3.1-tHBxΔ35重组慢病毒载体; 与3个质粒包装系统用磷酸钙方法共同转染到人293T细胞, 包装成病毒颗粒, 分别感染肝细胞LO2和MIHA, 并进行荧光和Western blot法检验细胞中wt-HBx和tHBxΔ35的表达情况. 用细胞计数, 细胞活力测定, 集落形成实验, 流式细胞仪等方法检测对肝细胞增殖和凋亡效应的影响.
结果
重组慢病毒载体及稳定转染细胞株构建成功, 转染后wt-HBx和tHBxΔ35在细胞中表达明显变化; tHBxΔ35过表达细胞的增殖速度明显高于wt-HBx组和CTRL对照组, 而感染wt-HBx组的肝细胞增殖速度比CTRL对照组和tHBxΔ35组增殖速度慢(P<0.05); tHBxΔ35可能通过促进细胞S期的合成而刺激细胞增殖, 而wt-HBx 可能通过捕获细胞的G0/G1期而抑制细胞增殖. 但tHBxΔ35, wt-HBx在肝细胞的凋亡率是很低的.
结论
HBx对肝细胞具有抑制增殖的作用, 而tHBxΔ35对肝细胞具有促进增殖的作用.
核心提要: 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)编码HBx蛋白在原发性肝癌发展中发挥重要的作用. 在肝癌组织中, HBx 羧基末端频繁易丢失35个氨基酸, 形成自然突变体HBx(truncated HBx, tHBxΔ35); 本研究主要探讨HBx和tHBxΔ35对正常肝细胞增殖的影响. 结果发现HBx对肝细胞具有抑制增殖的作用, 而tHBxΔ35对肝细胞具有促进增殖的作用. |
Persistent Identifier | http://hdl.handle.net/10722/254727 |
ISSN | 2020 SCImago Journal Rankings: 0.114 |
DC Field | Value | Language |
---|---|---|
dc.contributor.author | Zhu, RX | - |
dc.contributor.author | Yang, D | - |
dc.contributor.author | Seto, WKW | - |
dc.date.accessioned | 2018-06-21T01:05:33Z | - |
dc.date.available | 2018-06-21T01:05:33Z | - |
dc.date.issued | 2018 | - |
dc.identifier.citation | 世界华人消化杂志, 2018, v. 26 n. 13, p. 760-768 | - |
dc.identifier.issn | 1009-3079 | - |
dc.identifier.uri | http://hdl.handle.net/10722/254727 | - |
dc.description.abstract | 目的 构建野生型HBx(wild-type HBx, wt-HBx)和自然突变体HBx(truncated HBx, tHBxΔ35)重组慢病毒表达载体, 建立稳定转染细胞株, 观察wt-HBx和tHBxΔ35对肝细胞增殖和凋亡的影响. 方法 构建TOPO3.1- wt-HBx和TOPO3.1-tHBxΔ35重组慢病毒载体; 与3个质粒包装系统用磷酸钙方法共同转染到人293T细胞, 包装成病毒颗粒, 分别感染肝细胞LO2和MIHA, 并进行荧光和Western blot法检验细胞中wt-HBx和tHBxΔ35的表达情况. 用细胞计数, 细胞活力测定, 集落形成实验, 流式细胞仪等方法检测对肝细胞增殖和凋亡效应的影响. 结果 重组慢病毒载体及稳定转染细胞株构建成功, 转染后wt-HBx和tHBxΔ35在细胞中表达明显变化; tHBxΔ35过表达细胞的增殖速度明显高于wt-HBx组和CTRL对照组, 而感染wt-HBx组的肝细胞增殖速度比CTRL对照组和tHBxΔ35组增殖速度慢(P<0.05); tHBxΔ35可能通过促进细胞S期的合成而刺激细胞增殖, 而wt-HBx 可能通过捕获细胞的G0/G1期而抑制细胞增殖. 但tHBxΔ35, wt-HBx在肝细胞的凋亡率是很低的. 结论 HBx对肝细胞具有抑制增殖的作用, 而tHBxΔ35对肝细胞具有促进增殖的作用. 核心提要: 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)编码HBx蛋白在原发性肝癌发展中发挥重要的作用. 在肝癌组织中, HBx 羧基末端频繁易丢失35个氨基酸, 形成自然突变体HBx(truncated HBx, tHBxΔ35); 本研究主要探讨HBx和tHBxΔ35对正常肝细胞增殖的影响. 结果发现HBx对肝细胞具有抑制增殖的作用, 而tHBxΔ35对肝细胞具有促进增殖的作用. | - |
dc.language | chi | - |
dc.publisher | Baishideng Publishing Group. The Journal's web site is located at http://xxhb.chinajournal.net.cn/ | - |
dc.relation.ispartof | 世界华人消化杂志 = World Chinese Journal of Digestology | - |
dc.rights | This work is licensed under a Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License. | - |
dc.subject | 慢病毒载体 | - |
dc.subject | tHBxΔ35 | - |
dc.subject | HBx基因 | - |
dc.subject | 细胞增殖 | - |
dc.subject | 肝细胞 | - |
dc.title | HBx蛋白及其羧基末端缺失35个氨基酸的突变体对正常肝细胞增殖的影响 | - |
dc.title | Impact of wild-type and carboxyl-terminal truncated hepatitis B virus X on hepatocyte proliferation | - |
dc.type | Article | - |
dc.identifier.email | Seto, WKW: wkseto@hku.hk | - |
dc.identifier.authority | Seto, WKW=rp01659 | - |
dc.description.nature | published_or_final_version | - |
dc.identifier.doi | 10.11569/wcjd.v26.i13.760 | - |
dc.identifier.scopus | eid_2-s2.0-85046717999 | - |
dc.identifier.hkuros | 285236 | - |
dc.identifier.volume | 26 | - |
dc.identifier.issue | 13 | - |
dc.identifier.spage | 760 | - |
dc.identifier.epage | 768 | - |
dc.publisher.place | China | - |
dc.customcontrol.immutable | csl 180629 | - |
dc.identifier.issnl | 1009-3079 | - |